结合疫苗的生产



结合疫苗生产步骤总结如下:

  • 蛋白质生产: 寄助物发酵、
    收集、清洁、均化、回收并纯化蛋白质
  • 多糖生产:供体发酵、破坏细胞、纯化多糖、水解(酸、高碘酸盐)缩减
  • 衍生化:使两种成分反应
  • 结合:使各成分共同反应
  • 纯化:清除不需要的化合物
  • 加工和装填:浓缩至终凝强度,渗析至适当溶质,按液体无菌装填或冻干
 











这些样品活动的每一项皆需采取诸多极为精准的中间步骤。

疫苗的衍生化和结合将使用许多试剂。尽管蛋白质的制备和纯化程序相对较简单,但是糖类成分的制备、添加以及随后试剂的清除工作则颇为棘手。

已纯化的散装糖类缩减后必须按尺寸分类以满足产品规格。该步骤可通过体积排阻层析完成,但可能产生更大容量的稀释材料,而需通过超滤进行浓缩。因此,许多疫苗按超滤膜大小进行生产,糖类混合物则通过两个或更多不同的超滤膜进行过滤。例如,50 千道尔顿 (KD) 膜可用于排除大型污染、多糖聚合物和较大的多糖分子。

然后,滤液将流经 10KD 膜,该步骤将清除工艺中所用的小型分子、盐和溶剂,留下两道滤膜之间所“捕获”且尺寸范围相对较窄的多种低聚糖。

衍生化后,未反应的种类还可通过 10KD 膜冲洗,且处理后的低聚糖将洗滤成适合于随后结合反应的溶液。

可采用相似过程清除蛋白质中不需要的试剂。结合完成后,结合物还可再次通过小型多孔性超滤膜以清除未反应的结合化学物,并再次将结合物浓缩或洗滤至最终制剂强度和载液,然后形成含任何所需佐剂和防腐剂的制剂。

对某些疫苗而言,本产品为多价产品,换言之,其由多种糖类血清型组成。在这种情况下,每种血清型均单独制备和结合,然后在最终制剂中将多种血清型混合。Prevnar (Wyeth) 就是这样一类疫苗,含七种不同的多糖 – 血清型 4、6B、9V、14、18C、19F 和 23F,代表着最常见的类型。正在开发中的全新育苗将针对更多的血清型。这将使生产过程进一步复杂化,因为每一种均须单独生产和控制。这种复杂性使这种疫苗在可使用此类疫苗的发展中地区的经济高效的运输成为一大难题,也为在没有世界卫生组织和世界银行等组织的干预下可能无法购买此类疫苗的人士带来不便。

但是,仍可使用一些简单设备,至少在某种程度上可减少该类成本,且实际上美国、印度和亚洲的一些疫苗制造商也已使用这类设备。平板膜包通常用于超滤阶段,每个使用阶段配有专用支架和系统。对于多价疫苗以及含诸多 UF 工艺步骤的疫苗(甚至是单个的血清型),则此类多系统的成本可能较高。连续大量生产某种给定疫苗时,则此类成本更易于合理化。一次性技术可实现多种试剂制备、除菌过滤和混合,而基本无需使用资本设备。但是,较大规模的 UF 系统目前暂无法提供一次性技术。可提供含塑料衬管的系统,因此,仅需一套不锈钢罐(不接触液体)和数套衬管,每套专门用于单独的工艺部分或甚至还可用作一次性产品。