切向流过滤产品选择指南

切向流过滤 (TFF) 是一种分离和纯化生物分子的快速高效的方式。此种过滤可应用于各种生物学领域,如免疫学、蛋白质化学、分子生物学、生物化学和微生物学。TFF 可用于几毫升至几千升的样品溶液的浓缩或脱盐。它还可用于从小生物分子中分馏出大生物分子、收获细胞悬液以及澄清发酵液和细胞裂解液。

 

简化产品选择

考虑所需的生物分子

您所需的生物分子或产品可从低分子量污染物中保留或分离,或其可通过较高分子量污染物和颗粒并净化。

 

通常情况下,应选择比待保留的蛋白质分子量小三到六倍且带分子量截留 (MWCO) 的膜。其他因素也可影响适当 MWCO 的选择。例如,如果流速(或处理时间)是一个主要考虑因素,则选择小三倍且带 (MWCO) 的膜将产生更大流速。若恢复是主要考虑问题,则选择小六分之五的紧膜将产生最大恢复(流速较慢)。这些值应作为一般指南使用,因为溶质保留和选择可因诸多因素而各异,如跨膜压、分子形状或结构、溶质浓度、存在其他溶质以及离子条件。

 

我们的膜选择性强且通常可达到 95% 到 99% 的恢复率。这些膜的有限孔径分布可导致膜 MWCO 下方分子量的分子保留最小。
 







颇尔首选在线实验室检测

 

考虑流体特性

样品浓度和粘度决定了过程运行所需的通道类型。大多数 TFF 膜包均提供筛网或悬浮筛网配置。

 

切向流通道配置

切向流筛网通道配置筛网通道

在筛网通道配置中,编织分离器可在回流中形成温和的湍流,最大程度减少膜污垢。筛网通道配置与已过滤的 0.2 微米清洁溶液配用(释放可能被筛网捕获的颗粒或聚合物)。



 

筛网通道用于:
  • Minimate 装置
  • Ultrasette 装置
  • LV Centramate 膜包
  • Centramate 膜包

 

切向流悬浮筛网通道配置

悬浮筛网

悬浮筛网通道配置在回流通道中有更开放的结构,这种结构可在加工高粘性或含颗粒的溶液时提供更好的性能。




 

悬浮筛网用于:
  • Ultrasette 装置 
  • LV Centramate 膜包
  • Centramate 膜包

 

考虑样品容量和处理时间

适当膜包或装置尺寸的选择取决于样品总量、所需处理时间以及期望的最终样品量。颇尔生命科学实验室 TFF 装置的性能参数如下所示。

 

基于起始样品量的一般产品选择

 
TFF 囊式过滤器或膜包* 膜面积/囊式过滤器或膜包 50 LMH、20 °C 条件下的典型滤出流速 针对筛网通道的推荐回流流速/囊式过滤器或膜包 起始样品量范围 最小浓缩量***
实验室规模/规模扩大
Minimate 50 cm2 (0.05 ft2) 4 毫升/分钟 30 - 40 毫升/分钟 25 - 1000 毫升 < 10 mL
LV Centramate 0.01 平方米(0.1 ft2 8 毫升/分钟 60 - 80 毫升/分钟 40 - 2000 毫升 10 毫升
LV Centramate 0.02 平方米(0.2 ft2 15 毫升/分钟 120 - 160 毫升/分钟 60 - 4000 毫升 15 毫升
工艺开发和小规模生产
Ultrasette 0.084 平方米(0.9 ft2 4 升/小时 1200 - 1500 毫升/分钟 0.2 - 5 L 100 毫升
Centramate 0.093 平方米(1.0 ft2 4.6 升/小时 600 - 800 毫升/分钟 0.2 - 25 L 100 毫升
 

* 数据基于每个单元或膜包。Centramate 夹具可夹持五个膜包。将表格中的值乘以夹具中安装的膜包数量,即可计算出其他栏的数值。
** 常见滤出流速基于 50 LMH 的平均滤出流速和大约四小时的加工时间。根据膜的 MWCO、样品成分和粘度、操作条件(即跨膜压力、横流流速、温度等)等的不同,实际值可能更高或更低。
*** 最小浓缩量取决于系统滞留量、容器设计以及泵的类型和速度。通过最大程度减少管件长度和使用适当大小的组件、管材、接头等,可实现更小容量。